期刊简介

  本刊是经国家科委批准,国内外公开发行的中文预防医学,卫生学类核心期刊,主要读者对象为从事职业与环境卫生、预防医学职业病临床、安全环保等工作的科研人员,高等院校的师生,工矿医务人员,以及职业卫生、安全环保、劳动保护领域的管理人员。

            

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  • 杂志名称:工业卫生与职业病杂志
  • 主管单位:中国钢铁工业协会
  • 主办单位:鞍山钢铁集团公司
  • 国际刊号:1000-7164
  • 国内刊号:21-1147/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全国优秀科技期刊期刊收录:万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
工业卫生与职业病杂志2001年第02期

单细胞凝胶电泳技术在职业和环境医学生物监测中的应用

程淑群;王勋

关键词:单细胞凝胶电泳技术, 职业医学, 环境医学, 生物监测, 应用, Gel Electrophoresis, 损伤和修复, 单个细胞, 可检测, 荧光, 细胞水平, 人外周血淋巴细胞, 人群流行病学调查, 迁移, 分子质量, 方法, 细胞核, 试验, 断裂, 测定
摘要:单细胞凝胶电泳技术Single Cell Gel Electrophoresis,SCGE)是由Osting和Johanson首先提出,后经Singh等进一步完善的,在单个细胞水平上检测DNA损伤和修复的方法。其基本原理是:包埋在琼脂凝胶中的细胞在中性或碱性条件下经裂解与解螺旋后,如果细胞未受损伤,电泳时DNA因其分子质量大停留在核基质中,经荧光染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象。若有DNA损伤,在碱性电泳液中,先是DNA双链解螺旋且碱变性为单链,单链断裂的碎片因分子质量小可进入凝胶中,带负电荷的DNA游离断片在电泳时向阳极伸展,在荧光显微镜下,细胞核形成一个亮的头部和尾部,形似夜空中的彗星,故又称彗星试验(Comet Assay)。细胞核DNA受损愈严重,产生的断链或易变性断片就愈多,其断链或断片也就愈小。在电场作用下迁移的DNA量多,迁移的距离长,表现为尾长增加和尾部荧光强度增强,通过测定迁移部分的光密度和迁移长度就可定量测定单个细胞DNA损伤程度。与测定DNA损伤的传统方法相比较,SCGE具有以下优点:(1)SCGE能够对单个细胞的DNA损伤进行研究,避免了只能对细胞群体的DNA改变进行检测的不足;(2)使用范围广泛,可检测各种类型的组织、细胞,如脱落的人颊粘膜细胞、人白血病K562细胞、鱼的红细胞、植物种子细胞等,其中常用的是人外周血淋巴细胞;(3)简便,快速(一个工作日可完成),样品量少(一般只需几千个细胞),无需放射性标记;(4)敏感性高,可检测出0.1个DNA断裂/10-9道尔顿,在检测DNA断裂损伤方面,具有高度灵敏性,比目前已知的各种细胞水平的致突变方法如Ames、微核试验等更加敏感[1]。近十年来,该技术已广泛应用于遗传毒理学、放射生物学、药物筛选、肿瘤细胞生物学、衰老和细胞凋亡机制、人群流行病学调查等领域,研究各种有核细胞经受试验诱导的DNA损伤和修复[2]。该方法在职业医学中已得到广泛应用,在环境遗传毒物监测中的应用也有报道,本文就SCGE在职业医学及环境生物监测中的应用现状作一综述。